yy.vip易游-气相色谱层析

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　　）是以气体为流动相，利用组分在固定相与流动相间分配系数差异实现分离的分析技术

　　，各组因吸附/溶解能力差异形成不同运行速度，最终由检测器转化为电信号进行分析

　　。分离过程涉及气固色谱与气液色谱两种类型，色谱柱采用金属柱或毛细管柱，检测器涵盖

　　。该方法适用于沸点低于400℃的有机/无机试样分析，检测灵敏度可达毫微克级

　　该技术已广泛应用于微生物分类鉴定、临床传染病快速诊断、环境监测（如水质/土壤有机污染物检测）及农药残留分析领域

　　。其分析过程通常在数十分钟内完成，结果稳定且重复性好，但存在操作参数控制复杂、方法标准化难度较高等局限性。

　　可以用于分离固相、气相和液相标本。液相标本采用微升注射器穿过橡皮隔片注入，气相标本采用特种气相注射器注入。

　　色谱柱一般由金属或玻璃制成，通常采用的柱长2m~4m，内径2mm，毛细管柱长度可达20m～150m，内径为0.2mm。

　　载体一般采用惰性、多孔的固体颗粒。多由硅藻土或玻璃珠制成，分析不同极性的微生物化合物，为了获得最适的分离条件，要求有不同固定相的载体。比较常用的载体有：

　　（CarbOwax 20M）、F F A P（聚乙二醇20M 和2-硝基对苯二甲酸的反应产物），OV-17（苯基甲基硅酮）。OV-210、SE-30（甲基硅酮）、Chromosorb G（白色硅藻土载体）等。柱加热炉在温度控制上是非常重要。

　　要注意极性及最高使用温度，柱温不能超过最高使用温度。固定相按极性相似的原则选择。

　　色谱柱的内径大小、长度都能影响分离率。一般而言，内径越小，长度越长，分离效果越好，一般柱长为1m～5m（毛细管柱则20m～100m）。

　　填充剂颗粒一般采用40目～60目，60目～80目及80目～100目大小。长柱子宜用粒度大些的，以减少柱压降，短柱子则用粒度细的。

　　气相色谱中固定液的含量对分离效率的影响较大。一般采用固定液与载体重量之比为15︰100～25︰100。采用高灵敏度的检测器，由于进样量减少，固定液含量可以降至5︰100以下。这样可以使用较低柱温，从而提高柱效，缩短分析时间。但固定液用量太少会引起吸附。

　　柱温选择对分离度影响很大，常是条件选择的关键。选择的基本原则是：在使最难分离的组分有尽可能好的分离高度的前提下，尽可能采取较低温度，但以保留时间适宜及不拖尾为度。

　　①高沸点混合物（200℃～400℃），若需在较低的柱温下分析，可采用低固定液配比1%～3%，采用高灵敏检测器，柱温可比沸点低100℃～150℃，在200℃～250℃的柱温下分析。

　　②沸点300℃的样品，可用3%～25%固定液配比。沸点越低，所用配比越高，柱温可比平均沸点低50℃至平均沸点的范围选择。

　　载体采用低线速时，宜用氮气；高线速时用氢气。柱越长，柱内有较大压力降，宜用氢气。载气采用低线mL/min。

　　①气化室温度及检测室温度选择：气化温度取决于样品的挥发性、沸点、稳定性以及进样量，一般选择稍高于样品沸点，但不要超过沸点50%以上，以防分解。检测室温度需高于柱温，一般高于柱温30℃左右或与气化室同温。

　　②进样量：固定相在配比15%～35%的层析柱时，最大进样量液体为10μl，气体为10mL。一般样品量液体4μl，气体为0.5mL～3mL，固体小于1mg。

　　③桥电位选择：散热多和选择大的桥电位，在灵敏度相同的情况下，应尽量选择低桥电位，以保护热敏元件。

　　⑴称取一定量的载体于蒸发皿中，加2倍于载体体积的低沸点溶剂（氯仿丙酮、

　　⑵取适量的固定液，倒入蒸发皿中，拌匀。注意应使载体全部覆盖在液面下，于红外灯下缓缓加热，不时轻轻搅拌，待溶液全部挥发。

　　⑶先将柱的一端用玻璃毛轻轻堵上，接上吸滤真空泵，柱的另一端接上漏斗，将填充剂从漏斗加入，同时启动真空泵，不时轻敲柱子各部，以使填充均匀。装满后，关闭真空泵，取下色谱柱，将加样的一端也填上一小团玻璃毛。

　　⑷将柱装入色谱柱中，在通载气前，先将炉温升至略高于操作温度，保持约1h，以使固定液受热熔化或粘度减小，在载体表面流布均匀，然后再通入载气，使色谱柱在操作温度下通载气数小时。

　　⑴参考仪器使用说明书，将有关设备安装好，检查各系统各接头是否漏气，确定无误后，可开始操作。

　　⑵开气流总阀门，调节表头上的减压阀，使气体压力为22kg/cm2左右，调节稳压器针形阀，使载

　　⑶设定柱温 （根据仪器恒温箱的性能控制温度波动值在一定的范围之内，如±0.5℃）。一般所用的柱温是在被分析物质的平均沸点左右或更低一些。若被分析物的沸程太宽，则可用程序升温法来升高柱温。

　　（Gas Chromatography GC）是一种分离分析的方法，它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。

　　对于一已知范围的混合物，用此法定性很容易，但对于范围未知的混合物来说，则需要配合化学分析及其它仪器分析。

　　：同一种物质在一根层析柱上保留时间相同。取样品各可能组分的纯物质加入样品中，混合进样，对比加入后的色谱图，若某色谱峰相对谱高，则该色谱峰的组分与纯物质可能为同一物质。

　　②化学反应定性法：即把色谱柱的流出物，通过加入官能团试剂进行反应，观察试剂的颜色是否发生变化或是否有沉淀，而判断该组分含什么官能团或属于何类化合物。

　　在实验条件恒定时，峰面积或峰高与组分的含量成正比，因此可以利用峰面积或峰高面积或峰高来进行定量。同时与标准化合物的相对保留时间进行对比，对某化合物做出鉴定。